开心果过敏原的分离纯化及紫外光谱分析

作者：张爱琳; 赵慧娟; 刘翠翠; 权鑫; 杜丽平开心果分离纯化紫外光谱致敏性

摘要：目的对开心果中的过敏蛋白进行分离纯化,了解开心果过敏蛋白的初级结构和致敏性。方法将不同加工处理的开心果用二氯甲烷、TBS缓冲液进行过敏蛋白的提取分离,采用硫酸铵分级沉淀来初步提纯过敏蛋白,再通过透析、离子交换柱层析手段对开心果的致敏蛋白进一步纯化,最后通过考马斯亮蓝测蛋白含量,用紫外分光光度计波峰表征,确定开心果致敏蛋白质种类,通过SDS-PAGE电泳分析和WB免疫印迹实验验证开心果分离蛋白的致敏性。结果不同比例的有机溶剂提取开心果蛋白的分离效果不同,原味开心果1:3的得率最高达到49.49%;不同饱和度的硫酸铵沉淀蛋白质不同,浓度越小,析出蛋白质种类越多;经离子交换层析柱分离纯化之后,蛋白质的种类组分稳定,结合之外扫描图谱分析所测物质的结构中含有双键或三键,属于复合蛋白质的结构。结论开心果过敏原属于蛋白复合结构,主要以双键和三键的形式存在,热处理和盐焗加工会降低开心果过敏原的致敏性。

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