作者:孙嘉怡 任军 徐丽 贾凌云苯基配基疏水色谱阴离子交换色谱单胺氧化酶b猪肝
摘要:依据单胺氧化酶B(monoamine oxidase B,MAOB)的疏水特性,建立了一种从猪肝中分离纯化MAOB的新方法。用含有1%Triton X-100的膜蛋白裂解液制备粗酶,以饱和度为20%~50%的硫酸铵反抽提进行粗提,再利用自制的配基密度为75.7μmol/mL的苯基疏水色谱及Sepharose Q High Performance离子交换色谱进一步分离纯化,得到纯化倍数为18.2、酶比活为135U/mg的MAOB。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析显示为相对分子质量约60000的单一蛋白质带。采用高效液相色谱-电喷雾串联质谱对该酶进行鉴定,证实为MAOB。本研究所用分离纯化方法可以有效纯化MAOB,为MAOB的深入研究提供技术支撑。
注:因版权方要求,不能公开全文,如需全文,请咨询杂志社