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抑制CYP4A11基因表达的siRNAs优选及对血管收缩相关因子的影响

作者:李晋; 胡静; 李健; 石磊; 赵树进cyp4a11血管收缩因子

摘要:为了考察人细胞中细胞色素P450 4A11(CYP4A11)表达受抑制之后是否会影响血管相关收缩因子的表达,在线设计多个抑制细胞中代谢酶编码基因CYP4A11表达的si RNAs并通过BLAST验证;选择效果好的3对si RNAs合成并转染至EA.hy926细胞株,通过荧光染色和定量多聚酶链反应(quantitative polumerase chain reaction,q PCR)初步检测后,再采用表达量相对更高的MG63细胞系进行验证,发现25 nmol/L的si RNA2抑制效果最好;随后使用25 nmol/L si RNA2抑制CYP4A11在EA.hy926细胞株中的表达,并通过q PCR与Western-blot检测血管收缩相关因子的表达情况,发现促血管收缩相关因子内皮素1受体(endothelin 1 receptor,ET1R)、血管紧张素1型受体(angiotensin type 1 receptor,AT1R)表达下调(P〈0.05),而内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,e NOS)的表达显著上调(P〈0.001)。因此,si RNA2能通过显著抑制EA.hy926细胞中CYP4A11的表达,调节血管紧张的相关指标,有促血管松弛作用的趋势。

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生命科学研究

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