作者:黄建安 李娟 谭月萍 刘硕谦 李勤 刘仲华通用m13引物毛细管电泳四色荧光检测茶树
摘要:将毛细管电泳四色荧光检测技术应用于茶树SSR标记分析.该方法采用三引物PCR扩增SSR位点,三引物即在5’端加有M13尾巴序列(5’-CACGACGTTGTAAAACGAC-3’)的特异正向引物、特异反向引物及带有荧光标记的通用型M13引物:为了运用四色荧光检测系统使通过一次毛细管电泳能同时检测3个以上的SSR位点.采用蓝、绿、黑3种不同颜色的荧光染料分别对3个M13引一物进行标记.应用该方法对42个茶树品种(系)的16个SSR位点进行遗传分析的结果表明:此法具有简便、可靠、低成本及高通量的优点;且随着所分析SSR位点数的增加,降低成本的效果更加显著.采用建立的方法,还筛选获得了11个多态性丰富的可应用于茶树遗传研究的SSR标记.
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