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大鼠胚胎后肾间充质细胞的分离、培养及鉴定

作者:焦玉清 易著文 何小解 刘喜红 何庆南 党...后肾间充质细胞原代培养大鼠

摘要:分离、培养大鼠胚胎后肾间充质细胞(MMCS),取孕13d大鼠胚胎,分离胚胎肾脏,去除输尿管芽。消化后置37℃、5%CO2、饱和湿度的培养箱中培养.倒置相差显微镜下观察培养细胞,并行HE染色、电镜观察、生长曲线测定;ABC免疫酶染色法检测波形蛋白、角蛋白、nestin、CD133、CD34;直接免疫荧光法检测双花扁豆凝集素(Dolichos Biflorus,DB),并流式细胞术定量检测,MMCS形态为成纤维细胞样,贴壁生长,48~72h达生长高峰;波形蛋白、nestin、CD133表达阳性;角蛋白、CD34、DB表达阴性;MMCS以DB标记后流式细胞检测为单峰,结果表明:培养细胞为后肾间充质细胞.纯度较高并符合干细胞特征.

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生命科学研究

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