作者：石奕武; 胡维新; 罗赛群; 江元山; 易伟峰...dazap2表达下调原核表达抗体
摘要：为了进一步从蛋白水平上检测DAZAP2(deletedinazoospermiaassociatedprotein2)在多发性骨髓瘤患者中的表达及研究DAZAP2的功能,以正常人的骨髓单个核细胞的总RNA为模板,RT-PCR扩增DAZAP2完整编码序列,构建原核表达重组质粒pQE30-DAZAP2,转化大肠杆菌JM109后,加IPTG诱导表达4h时,表达蛋白显著增加,Ni-NTA层析柱纯化蛋白,以该纯化蛋白免疫新西兰大白兔,制备抗DAZAP2抗体,ELISA检测抗体的效价在1:6400以上,Westernblot检测抗体的特异性较好.用该抗体检测出DAZAP2在6例正常人及4例多发性骨髓瘤患者中有表达,其他7例患者中没有表达,与RT-PCR结果一致,该抗体具有一定的临床应用前景,并能进一步用于功能研究.
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