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原癌基因c-erbB2和c-myb经丝裂原活化蛋白激酶和成熟促进因子途径调节卵母细胞的成熟

作者:郑月慧 郑莉萍 李芳 吴磊 戴育成卵母细胞成熟基因丝裂原活化蛋白激酶成熟促进因子

摘要:本研究探讨了原癌基因c-erbB2和c-myb对小鼠卵母细胞成熟的影响及其在调控卵母细胞成熟中与丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)和成熟促进因子(maturation promoting factor,MPF)的上下游关系。c-erbB2反义寡脱氧核苷酸(anfisense oligodeoxynucleotide,ASODN)和c-myb ASODN均呈剂量依赖方式抑制卵母细胞的生发泡破裂(germinalvesicle breakdown,GVBD)率和第一极体(first polar body,PB1)排放率,并显著延迟其成熟时间。小鼠卵母细胞显微注射重组人c-erbB2蛋白和c-myb蛋白后,培养6h其GVBD率分别比对照组上升了23.1%(P〈0.05)和32.2%(P〈0.05),培养12h其PB1排放率分别比对照组上升了17.3%(P〈0.05)和23.5%(P〈0.05)。RT-PCR结果显示,小鼠卵母细胞中存在c-erbB2 mRNA和c-myb mRNA表达:c-erbB2 ASODN能明显抑制卵母细胞中c-erbB2 mRNA和c-myb mRNA的表达,c-myb ASODN能明显抑制卵母细胞中c-myb mRNA的表达,对c-erbB2 mRNA无明显影响;MAPK抑制剂PD98059以及MPF抑制剂roscovitine在抑制卵母细胞成熟的同时,均能阻断显微注射重组人c-erbB2蛋白和重组人c-myb蛋白对卵母细胞成熟的促进作用,但对卵母细胞中c-erbB2 mRNA和c-myb mRNA表达无明显影响。Western blot结果显示,c-erbB2 ASODN、c-myb ASODN、PD98059、roscovitine均使卵母细胞中MAPK磷酸化水平和cyclinB1含量下降。结果提示,原癌基因c-erbB2、c-myb在卵母细胞成熟中起重要作用,可能是调控卵母细胞成熟中关键蛋白激酶如MAPK、MPF的上游激活物。

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生理学报

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