作者：王国卿; 傅春玲; 李建祥; 杜玉珍; 童建clock基因昼夜节律光照视交叉上核松果体
摘要：本研究旨在观察和比较视交叉上核（suprachiasmatic nucleus，SCN）与松果体（pineal gland，pG）中Clock基因内源性昼夜转录变化规律以及光照对其的影响。Sprague-Dawley大鼠在持续黑暗（constant darkness，DD）和12h光照：12h黑暗交替（12hourlight：12hour-darkcycle，LD）光制下分别被饲养8周（n=36）和4周n=36）后，在一昼夜内每隔4h采集一组SCN和PG组织（n=6），提取总RNA，用竞争性定量RT-PCR测定不同昼夜时点（circadian times．CT or zeitgeber times．ZT）各样品中Clock基因的mRNA相对表达量，通过余弦法和ClockLab软件获取节律参数，并经振幅检验是否存在昼夜节律性转录变化。结果如下：（1）SCN中Clock基因mRNA的转录在DD光制下呈现昼低夜高节律性振荡变化（P〈0．05），PG中Clock基因的转录也显示相似的内源性节律外观，即峰值出现于主观夜晚（SCN为CTl5，PG为CT18），谷值位于主观白天（SCN为CT3，PG为CT6）（P〉0．05）。（2）LD光制下SCN中Clock基因的转录也具有昼夜节律性振荡（P〈0．05），但与其DD光制下节律外观相比，呈现反时相节律变化（P〈0．05），且其表达的振幅及峰值的mRNA水平均增加（P〈0．05），而PG中Clock基因在LD光制下转录的相应节律参数变化却恰恰相反（P〈0．05）。（3）在LD光制下，光照使PG中Clock基因转录的节律外观反时相于SCN（P〈0．05），即在SCN和PG的峰值分别出现于光照期ZT10和黑暗期ZT17，谷值分别位于黑暗期ZT22和光照期ZT5。结果表明，Clock基因的昼夜转录在SCN和PG中存在同步的内源性节律本质，而光导引在这两个中枢核团调节Clock基因昼夜节律性转录方面有着不同的作用。
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