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基于量子点免疫层析技术的IL-6定量检测方法建立

作者:程云龙; 于林; 李双法; 李奎量子点免疫层析法炎症

摘要:目的本研究建立了一种基于量子点标记技术和免疫层析技术的IL-6的检测方法,并对其性能及临床应用进行初步探讨。方法在偶联剂碳二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(N-hydroxysuccinimide,NHS)作用下,使抗IL-6单克隆抗体Ⅰ(Ab1,小鼠)与羧基量子点(CdSe/ZeS)偶联,制备量子点标记物;以抗IL-6单克隆抗体Ⅱ(Ab2,小鼠)作为捕获抗体,建立双抗体夹心量子点免疫层析法试纸条检测IL-6,依据建立方法制备IL-6试剂,并考核试剂的精密度、灵敏度和线性范围;应用该试剂检测重症监护室住院感染患者及健康人血清临床标本200份,与罗氏电化学发光法进行方法学比较。结果本研究建立的量子点免疫层析法试剂的分析内和分析间精密性均小于10%;空白检测限为0.27pg/mL,最低检测限为0.79pg/mL,功能灵敏度为2.0pg/mL;线性范围为2.0-5000pg/mL;与罗氏电化学发光法相比较,两种方法测定结果的回归方程为Y=0.9704X+4.685,相关系数R2=0.9963。结论本研究所建立的量子点免疫层析法IL-6试剂性能良好,该方法操作简便、检测快速、灵敏度高,适用于炎症及感染人群的早期鉴别诊断。

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