作者:余淑英 赵博生东亚三角涡虫肌球蛋白轻链原核表达蛋白质印迹法
摘要:构建了涡虫肌球蛋白轻链融合蛋白原核表达载体,并进行表达,根据涡虫基因文库中肌球蛋白轻链(Mlc)基因完整的ORF序列设计合成特异性51物,通过PCR扩增涡虫Mlc基因,并插入到融合蛋白原核表达载体PET-28a中,转化宿主菌B121(DE3)细胞.0.4mMol/L的IPTG诱导表达MLc蛋白.重组质粒测序和酶切结果显示Mlc基因已正确插入PET-28a中,重组蛋白经SDS—PAGE在18.2KD处有一条明显的蛋白表达条带。western blot检测得到同样大小的条带。结果表明,涡虫His-MLC融合蛋白已成功表达。
注:因版权方要求,不能公开全文,如需全文,请咨询杂志社