作者:李学礼; 李艳娜; 吕立夏; 高景霞; 何露; ...bdnf细胞周期相关蛋白细胞分化
摘要:研究不同浓度的脑源性神经营养因子(BDNF)在体外诱导SH-SYSY细胞分化时对G1期细胞周期相关蛋白表达的影响。采用全反式维甲酸(RA)和低(1ng/ml)、中(10ng/ml)、高(100ng/ml)三种不同浓度BDNF在无血清培养液中相继诱导SH-SY5Y细胞分化,形成均一的具有神经元形态的细胞。以实时定量RT-PCR法检测G1期细胞周期相关蛋白(包括cdk4,cdk6,cyclinD1,CyclinE,p16和p27)的mRNA水平的表达变化。结果显示:不同浓度的BDNF处理后,Cdk4 mRNA的表达水平均低于未分化细胞组(P〈0.05);Cdk6和CyelinD1的mRNA表达水平与RA组比较显著降低(P〈0.05),CyclinE和p16的mRNA表达水平仅在高浓度BDNF处理后明显降低,与未分化组比较P〈0.05,p27的mRNA表达水平无显著变化。以上结果提示BDNF在诱导SH-SY5Y细胞分化的同时无意促使其再进入细胞周期。同时,用RA预处理5d后改换BDNF培养SH-SYSY细胞,可使细胞展现出成熟神经细胞的形态,是体外研究某些脑疾病的理想细胞模型。
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