作者:钟欢; 何玉; 谈志丽; 刘亮明急性肝衰竭自噬urantide小鼠
摘要:目的 探讨尾加压素II(urotensin II,UII)及其受体系统(urotensin II receptor,UT)对急性肝衰竭(acuteliverfailure,ALF)小鼠肝脏自噬水平的影响.方法查Balb/c小鼠随机分为4组(每组6只).A组:健康对照组:B组:预处理对照组;C组:模型组:D组:预处理模型组.B组和D组给予0.6mg/kgUrantide尾静脉注射预处理.30min后,C组和D组立即以脂多糖(1ipopolysaccharide,LPS)联合D-半乳糖胺(D.galactosamine,D.GalN)腹腔注射诱导急性肝衰竭.LPS/D—GalN攻击6h后采集小鼠血清和肝组织样本.测量血清谷丙转氨酶(alaninetransaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartatetransaminase,AST)水平以评价肝损伤情况.采用实时荧光定量PCR(real-time PCR,RT-PCR)检测Beclin-1、AtgS(autophagyrelated5)、Atg7、Sqstml(sequestosome1)/p62和三amRNA(microtubule.associated protein1lightchain3)水平,采用免疫印记技术(Westernblot)检测LC3.7p62蛋白质含量.结果模型组和预处理模型组ALT和AST水平与健康对照组和预处理对照组相比较均明显增高(P〈0.01),其中预处理模型组较模型组明显降低(P〈0.01).RT-PCR结果显示模型组和预处理模型组小鼠肝组织中Beclin-1、Atg5、Atg7、p62-LC3mRNA水平均较健康对照组和预处理对照组低(P〈O.05):而模型组和预处理模型组、健康对照组和预处理对照组各自间比较均无统计学差异(P〈0.05).Westernblot结果也显示,模型组和预处理模型组小鼠肝组织中LC3和p62蛋白水平均较健康对照组和预处理对照组低(P〈0.05):而模型纽和预处理模型组、健康对照组和预处理对照组各自问比较均无统计学差异(P〉0.05).结论UII/UT系统对LPS/D-GaIN诱导ALF小鼠下调的肝组织自噬水平无明显影响.
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