作者：李庆勇 张清华 蒋知新 沙杭 林虎 李安全 ...生物人工肝零下非结冰细胞凋亡
摘要：目的：探讨零下非结冰保存肝细胞的效果及其与细胞凋亡的关系.方法：UW液保存的C3A细胞悬液分为3组：-0.8℃组（零下非结冰组）,0℃组（0℃非结冰组）,4℃组（对照组）.低温保存24、48及72h后,采用流式细胞术分别测定细胞存活率及凋亡率,同时测定LDH、乳酸释放,细胞内ATP含量、尿素合成功能及白蛋白分泌功能,同时观察细胞形态.结果：零下非结冰组较0℃非结冰组及对照组明显提高了低温保存72h的C3A细胞的存活率（86.49%±2.80%vs81.50%±2.83%,77.83%±3.40%,均P〈0.05）,降低了细胞凋亡率（1.26%±0.84%vs5.34%±1.20%,9.16%±1.99%,均P〈0.05）;明显抑制了低温保存72h乳酸以及LDH释放（乳酸：10.38μg/106cells±1.40μg/106cellsvs12.02μg/106cells±1.64μg/106cells,17.41μg/106cells±2.40μg/106cells;LDH：80.10U/L±11.10U/Lvs120.04U/L±14.32U/L,148.98U/L±15.37U/L,均P〈0.05）;更好地维持了低温保存72hC3A细胞内ATP含量、尿素合成功能、及白蛋白分泌功能（均P〈0.05）.形态上,零下非结冰组保存细胞死亡比例少,细胞接触良好,未见对照组及0℃非结冰组细胞膜周围出现＂毛刺＂样改变及细胞内的＂空泡样＂改变.结论：在零下非结冰条件下保存肝细胞,建立一个＂血库样＂（readytouse）肝细胞库,可以有效促进生物人工肝的发展.
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