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脂联素随原代HSC活化表达的动态变化及其对原代HSC表达MMP-13的影响

作者:于丹; 马红肝星状细胞肝纤维化实时荧光聚合酶链反应酶联免疫吸附反应

摘要:目的:探讨脂联素mRNA在原代肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)活化过程中表达的变化趋势,以及其对体外培养的原代HSC增殖状况和金属基质蛋白酶-13(MMP-13)mRNA与蛋白表达的影响. 方法:改良的肝脏二步原位灌注法分离培养原代HSC;以α-SMA为原代HSC活化的标志,Real—time PCR方法检测随HSC活化脂联素表达的动态变化:MTT方法检测脂联素对活化HSC增殖的影响.以外源性脂联素处理原代HSC,根据脂联素浓度,分为对照组,脂联素处理浓度62.5μg/L,125μg/L,250μg/L,500μg/L五组,Real—timePCR方法检测MMP-13mRNA表达:ELISA方法检测原代HSC分泌的MMP-13蛋白量. 结果:HSC存活率的下降与脂联素浓度呈线性相关(OR=0.828).MMP-13mRNA和蛋白表达水平与外源性加入脂联素浓度正相关,当脂联素浓度增加至500g/L时,MMP-13mRNA表达增高至对照组的5.54倍,MMP-13含量增加至30.951μg/L显著高于对照组的24.127μg/L,差异具有显著统计学意义. 结论:脂联素具有抑制肝纤维化的作用,其机制可能与抑制HSC增殖和增强MMP-13在HSC细胞的表达有关.

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