作者：郑丽端; 童强松; 汪良; 董继华; 侯晓华胃癌xiap基因反义rna基因表达细胞凋亡
摘要：目的：观察下调X连锁凋亡抑制蛋（XIAP）基因表达对胃癌细胞化疗敏感性的影响．方法：构建XIAP基因反义真核表达载体。稳定转染胃癌细胞株MKN-45。RT—PCR和Western blot法检测癌细胞XIAP基因表达．选用顺铂、丝裂霉素分别处理转染前后的胃癌细胞，采用MTT比色法、克隆形成抑制实验检测癌细胞体外生长活性：透射电镜、流式细胞术、TUNEL检测癌细胞凋亡及比率：Western blot和比色法检测细胞内caspase-3蛋白表达和活性水平．结果：RT—PCR和WeStern blot证实．稳定转染反义XIAP基因的胃癌细胞MKN-45的XIAP mRNA和蛋白表达水平分别降低84．75％（P〈0．01）和89．75％（P〈0．01）．各浓度顺铂、丝裂霉素处理24h后。转染反义XIAP基因的MKN-45细胞生长抑制率分别增加7．3％-25．3％（P〈0．01），12．3％-16．3％（P〈0．01）．透射电镜下可见部分细胞发生典型的凋亡形态学改变，凋亡率分别为34．12％和32．5％。显著高于未转染对照组MKN-45细胞的凋亡率（14．2％，P〈0．05）．与MKN-45N胞比较。稳定转染反义XIAP基因的MKN-45细胞内caspase-3表达水平增高2．454倍（P〈0．01），活性水平提高3．68倍（P〈0．01）．结论：通过反义RNA技术下调XIAP基因表达，能提高癌细胞中caspase-3的表达和活性，增强化疗药物对癌细胞的诱导凋亡作用．
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