作者:孙向荣; 徐珞; 叶俊丽胃电刺激下丘脑腹内侧核增食欲素免疫
摘要:目的:观察胃电刺激(GES)对大鼠下丘脑腹内侧区(VMH)胃扩张(GD)相关神经元的作用及脑内增食欲素(orexin)表达的影响,初步探讨GES的中枢作用机制,方法:选用成年Wistar大鼠52只,采用细胞外记录神经元单位放电方法,记录VMH神经元自发放电活动,根据神经元对胃扩张刺激反应的不同,分为胃扩张兴奋性神经元(GD-E)和胃扩张抑制性神经元(GD-I),观察3组不同参数的胃电刺激(GES1,GES2,GES3)对VMH内GD-E和GD-I放电频率的影响:GES1(6mA,0.3ms,40Hz,2s-on,3s-off)为标准参数:GES2的串刺激持续时间减少为0.1s;GES3的串刺激频率减少至20Hz,其他参数均同GES1.采用免疫荧光组织化学染色方法和放射免疫分析法观测胃电刺激2h对大鼠下丘脑外侧区(LHA)增食欲素-A(orexin-A)阳性神经元和不同脑区orexin含量表达的影响.结果:VMH记录的96个神经元中有82个神经元(85.41%)对胃扩张刺激(GD,3.5mL,10-30s)有反应,其中31个(37.8%)为胃扩张兴奋性(GD-E)神经元,51个(62.2%)为胃扩张抑制性(GD-I)神经元.GES1,2,3分别兴奋了55.0%,17.6%,14.3%的GD-E神经元,GESl对GD-E神经元的作用明显强于GES2和GES3(P=0.002,P=0.016).63.6%,37.9%和51.9%的GD-I神经元分别被GES1,2,3所兴奋,其中GES2的兴奋作用较弱(P=0.043).GES1刺激胃窦部2h,下丘脑LHA orexin-A免疫阳性神经元表达明显减少(6.97±1.51/0.1mm^2 vs 26.62±8.30/0.1mm^2,P〈0.01);且下丘脑、中脑、延脑和孤束核中orexin免疫反应物(IR)的含量与对照组相比明显减少(112.54±11.58fmol/mg vs 185.23±15.22 fmol/mg.P〈0.01;71.95±8.45fmol/mg vs 98.48±12.02fmol/mg.P〈0.05:72.36±6.58fmol/mg vs 101.29±15.22fmol/mg.P〈0.05;69.12±4.99fmol/mg vs 89.21±9.23fmo
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