作者：王颖; 王家(马龙); 吴亮靶向survivin基因表达及原发性肝癌survivin表达survivin反义寡核苷酸westernblot法反义survivinsurvivin原位末端标记法hepg2细胞流式细胞术检测细胞生长抑制率化疗药物敏感性凋亡指数门静脉癌栓
摘要：目的:研究原发性肝癌survivin基因表达及治疗靶点作用.方法:收集肝癌和癌旁组织40例.Western blot法检测survivin蛋白表达,RT-PCR法检测survivin mRNA.原位末端标记法检测组织凋亡指数.设计合成survivin反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,AS ODN)转染hepG2细胞,设置空白对照组、脂质体组、正义链组和各浓度AS ODN组.流式细胞术检测凋亡指数,MTT法检测化疗药物对细胞生长抑制率.建立原位荷肝癌鼠模型并分为3组:反义survivin链组、空白对照组及脂质体组.V=ab2/2计算肿瘤体积,以V治疗后/V治疗前×100%计算生长指数.结果:肝癌细胞株和34/40例肝癌组织表达survivin蛋白及mRNA,癌旁组织无surviyin表达.肝内转移组(93.5%)和门静脉癌栓组(92.8%)survivin蛋白表达阳性率显著高于阴性组(55.6%)和无癌栓组(66.7%)(P＜0.05).肝内转移组(1.105±0.396)和门静脉癌栓组(1.137±0.404)survivin mRNA水平显著高于阴性组(0.572±0.082)和无癌栓组(0.627±0.122)(P＜0.05).Survivin阳性组织凋亡指数为1.15±0.33%,显著低于阴性组(4.50±0.83%)(P=0.00002).AS ODN组survivin表达减弱,凋亡指数增高,200nmol/L组为10.50±0.76%,400nmol/L组为12.99±0.42%,600 nmol/L组为22.21±1.26%,明显高于对照组(P＜0.05).化疗药物对ASODN组生长抑制率增高,200 nmo1/L组为47.7±4.6%(5-FU)、59.7±3.5%(DDP),400 nmol/L组为56.8±4.0%(5-FU)、68.2±2.1%(DDP),600nmol/L组为85.2±2.3%(5-FU)、79.9±3.7%(DDP),明显高于对照组(P＜0.05).23/25裸鼠成功建立原位荷肝癌动物模型.AS ODN组肿瘤生长指数为51.0±24.2%,显著低于空白对照组(70.2±23.4%)和脂质体组(168.0±28.6%)(P＜0.05).AS ODN组凋亡指数为21.97±2.11%,显著高于空白对照组(3.21±0.57%)和脂质体组(3.07±0.81%)(P＜0.05).结论:survivin在HCC发生中有重要作用.survivin ASODN转染能下调survivin表达,诱导细胞凋亡,增加HCC细胞对化疗药物敏感性.survivin AS ODN对荷HCC鼠有一定治疗作用.
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
