作者:任玥欣; 宋于刚; 陈学清; 智发朝; 钟世顺...真核表达质粒构建鉴定急性胰腺炎
摘要:目的:构建并鉴定真核表达质粒pcDNA3.1(+)-MCP-1和pcDNA3.1(+)—Gmoα.方法:据GeneBank中大鼠MCP-1和Groα cDNA序列设计并合成引物,提取急性胰腺炎模型大鼠总RNA,RT-PCR扩增,并将扩增产物TA克隆至pGEM—Teasy载体,然后分别双酶切pGEM—MCP-1和pGEM—Groα回收目的片段再克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+).结果:pcDNA3.1(+)-MCP—1和pcDNA3.1(+)-Groα真核表达质粒构建完成后,用限制性内切酶、PCR及DNA序列分析等多种方法进行鉴定,证实其构建成功.结论:pcDNA3.1(+)-MCP-1和pcDNA3.1(+)-Groα真核表达质粒构建成功,为进一步研究该真核表达质粒的免疫保护效果及制备急性胰腺炎pcDNA3.1(+)-MCP-1和pcDNA3.1(+)-Groα DNA疫苗奠定了基础.
注:因版权方要求,不能公开全文,如需全文,请咨询杂志社