作者:池小琴肿瘤靶向分子重组亲合体表达纯化靶向能力分析
摘要:目的实现重组亲合体的高效表达和纯化,并验证其活性。方法选择2016年1—12月该院收治的56例卵巢癌患者为研究对象,对HER2亲合体编码序列进行优化,增加其与纳米载体的连接位点,提高表达和纯化效率。重组表达产物Z_(HER2:342)经过凝胶亲和层析纯化和质谱检测分子量,并将纯化产物作为靶向分子连接纳米药物,检测其对HER2高表达细胞的靶向能力。结果 Z_(HER2:342)重组亲合体产物纯度约为97.8%,回收效率1.0 mg/mL。纯化产物分子量为7.648 kDa,与理论值7.631 kDa误差0.2%,表明构建的Cys-Z_(HER2:342)-6His重组亲合体正确。细胞实验表明其可显著提高纳米药物对乳腺癌细胞的细胞毒性(P〈0.01),对HER2高表达的肿瘤细胞具有特定的靶向性。结论重组表达产物Z_(HER2:342)构建正确,可实现高效表达纯化并对HER2高表达的肿瘤细胞具有特定的靶向性。
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