作者：刘艳; 吴彤; 汪晓强; 陈雪梅; 苏殿三; 俞...受体阿片样乳腺肿瘤细胞增殖
摘要：目的观察mu阿片受体（MOR）在胰岛素样生长因子Ⅰ（IGF Ⅰ）致人乳腺癌细胞增殖行为中的作用。方法选取表达MOR的人乳腺癌细胞株MCF-7，采用Western印迹法（n=3）检测IGFⅠ刺激对细胞内MOR蛋白表达的影响。采用细胞计数试剂盒8（CCK-8，n=6）和流式细胞术（n=3）分析外源性MOR激动剂（DAMGO）和特异性MOR拮抗剂甲基纳曲酮（MNTX）对IGFⅠ致乳腺癌细胞增殖的影响。采用Western印迹法（n=3）检测MOR不同活化状态下，IGFⅠ下游蛋白激酶B（Akt）通路的激活水平。结果Western印迹法结果显示，以20、100、1000μg／L不同质量浓度IGF I刺激24h，IGFⅠ为20和100μg／L时MOR蛋白的相对表达水平均显著高于对照组（P值均〈0．01），在IGFI质量浓度为100μg／L时作用最显著。以100μg／L IGF I刺激MCF-7细胞15和30min，以及1、6、12和24h，刺激15min时MOR蛋白的表达水平即开始升高，刺激30 min和1、6、12、24h时均显著高于对照组（P值分别＜0．05、0．01），在刺激6h时作用达到高峰。流式细胞术检测细胞周期的结果显示，采用100μg／L IGF Ⅰ刺激MCF-7细胞24h后，处于增殖期的细胞数量显著多于对照组（P＜0．01）；采用10 μmol／L DAMGO预处理2h后再与IGFⅠ共同刺激24h，处于增殖期的细胞数量进一步增多，显著高于对照组和IGFI单独刺激组（P值均＜0．01）；而DAMGO单独刺激组处于增殖期的细胞数量与对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。CCK-8检测细胞活力的结果与细胞周期的检测结果一致。此外，MCF-7单独用1 μmol／L MNTX预处理2h，细胞活力与对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05）；MNTX预处理2h后再与IGF I共同刺激，细胞活力与IGF Ⅰ单独刺激组相比差异无统计学意义（P〉0．05）；但在DAMGO与MNTx同时预处理2h后再给予IGFI，细胞活力显著低于IGFⅠ与DAMGO联合刺激组（P＜0．01）。Western印迹法�
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