作者:谭斐; 赵琛; 李桂晨; 景良; 郭阳脑源性神经营养因子原肌球蛋白受体激酶b磷脂酰肌醇3一激酶抑制剂丝裂原活化蛋白激酶抑制剂神经母细胞瘤细胞
摘要:目的探讨在无血清培养条件下脑源性神经营养因子(BDNF)对神经元样细胞存活的影响及其作用机制。方法在无血清条件下培养具有BDNF受体TrkB表达的神经母细胞瘤细胞SY5Y-TrkB,在培养液中单独加入BDNF,或联合加入磷脂酰肌醇3-激酶(P13K)抑制剂/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂进行细胞培养,利用细胞活性测定法(MTS)检测活细胞活性。结果与在10%胎牛血清(FBS)培养液中培养的细胞相比,无血清条件下培养24、4872h后,SY5Y-TrkB细胞的存活率分别为51%、38%、25%。若细胞在无血清条件下培养24h,无处理因素的细胞存活率设定为100%,给予BDNF后的细胞存活率为154%;用10μmol/LP13K抑制剂LY294002预处理1h,再给予BDNF后的细胞存活率为100%;而应用80/μmol/μMAPK抑制剂PD98059预处理1h,再给予BDNF后的细胞存活率为158%。结论BDNF通过P13K信号通路保护SY5y-TrkB细胞免妥无血清培养引起的细胞死亡。
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