作者:王大涛 赵海平 褚文辉 杨福合 邢秀梅 王...s100a4基因肿瘤鹿茸逆转录病毒载体融合蛋白
摘要:为了研究梅花鹿S100A4(S100 calcium binding protein A4)基因在鹿茸生长过程中的作用。用RT-PCR法从生茸骨膜细胞总RNA中克隆了梅花鹿S100A4基因,在NCBI中对基因序列进行比对;将完整的基因序列与逆转录病毒表达载体pLEGFP-C1重组,获得了重组质粒pLEGFP-S100;用脂质体法将pLEGFP-S100与pVSV-G(被膜载体)共转染包装细胞GP2-293,获得重组病毒上清液,感染角柄骨膜细胞后逆转录病毒携带的基因进入宿主细胞。结果显示:S100A4基因是一个相对保守的基因,与多个物种的匹配度达到90%;重组逆转录病毒载体pLEGFP-S100可以形成重组逆转录病毒粒子,将S100A4基因导入靶细胞,并表达S100A4与GFP(Green fluores-cent protein)的融合蛋白。
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