作者：李纾; 潘克清; 葛少华; 谢瑞阅; 段学静; ...牙本质基质蛋白1骨桥蛋白骨涎蛋白免疫组织化学
摘要：目的:研究牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein 1,DMP1)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)及骨涎蛋白(bore sialoprotein,BSP)在小鼠成牙骨质细胞分化及牙骨质形成中的时空分布特点.方法:取出生后第5、10、15、25天的BALB/c小鼠36只,引颈处死,解剖分离含下颌第一磨牙区的下颌骨,新鲜配制4%多聚甲醛固定过夜,甲酸-甲酸钠复合脱钙液脱钙1～3周,常规石蜡包埋,近远中向5μm连续切片,免疫组化PV二步法检测DMP1、OPN及BDP的表达.采用CMIAS2000多功能真彩色病理图像分析系统,高倍镜下每张切片阳性部位沿牙骨质表面随机选取不相重叠的10个视野,计算机测量其积分光密度值,取其均值,计为该指标的1个标本的积分光密度值.相同指标重复3次,均值作为该指标在该标本中的表达强度,各指标在不同发育期的积分光密度值采用重复测量数据方差分析,分别进行统计学处理.结果:DMP1、OPN及BSP在小鼠成牙骨质细胞分化及牙骨质形成过程中呈先后不同的时相表达.DMP1表达最早,出生后第5天在牙囊细胞中表达阳性,一旦牙囊开始分化为牙周膜细胞、成牙骨质细胞和成骨细胞,其表达开始转为阴性;而OPN至出生后第10天出现表达,第15天达到高峰,此后持续表达至牙发育完成的第25天;BSP直到第15天开始表达,持续到第20天后开始减弱,至牙根发育第25天近阴性表达.对3种调节因子的染色积分光密度值的方差分析结果显示:除OPN在第15～25天之间无显著性差异外,其他各因子两两比较差异均具有显著性.结论:牙骨质是由不同序贯发生的多种调节信号顺序启动牙囊细胞分化成牙骨质细胞而形成,DMP1、OPN及BSP在这一过程中先后起着重要的调节作用.
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