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对阴道加德纳菌、白色假丝酵母菌有抑制作用的人阴道乳酸杆菌的筛选和功能

作者:王则绯; 谭宏伟乳酸杆菌阴道加德纳菌白色假丝酵母菌细菌性阴道病外阴阴道念珠菌病

摘要:目的从健康妇女阴道分泌物中分离并筛选出对阴道加德纳菌(Gv)或白色假丝酵母菌(Ca)具有抑菌活性的乳酸杆菌,并观察其功能。方法采集30例健康育龄妇女的阴道分泌物,经数次增菌培养-平板分离后选出疑似乳酸杆菌菌株,采用16S rDNA基因测序法确定菌株类型。采用双层琼脂扩散法评价其中的乳酸杆菌菌株对指示菌(10种细菌和5种假丝酵母菌)的抑菌效果,筛选出具有抑Gv/Ca活性的人阴道乳酸杆菌。采用共孵育实验定量观察筛选出的人阴道乳酸杆菌对Gv/Ca的抑菌活性,同时观察筛选出的乳酸杆菌菌株的产过氧化氢、产乳酸能力,以及自聚合/共聚合能力和生物膜形成能力。结果 30例健康女性阴道分泌物中分离出51株菌,其中23株具有乳酸杆菌特征。16S rDNA基因测序确定其均为乳酸杆菌。双层琼脂扩散实验结果显示,共有8个菌株对Gv/Ca有抑菌作用:包括仅抑制Gv的2号菌株、仅抑制Ca的7、26和44号菌株以及对同时抑制二者的16、19、31和41号菌株。上述8个菌株即为筛选出的有抑Gv/Ca菌活性的人阴道乳酸杆菌。筛选出的8种乳酸杆菌与Gv共培养时,全部菌株均显示了抑菌活性,其中41号菌株完全抑制了Gv的生长;当用乳酸杆菌培养上清液孵育Gv时,全部菌株培养上清液均显示了明显的抑菌活性。当乳酸杆菌与Ca共培养时,全部菌株均显示了抑菌活性;当乳酸杆菌培养上清液孵育Ca时,全部菌株培养上清液均显示了抑菌活性,其中19号菌株完全抑制了Ca的生长。8个乳酸杆菌菌株p H值、乳酸生成量和过氧化氢生成量与阴性对照菌株相比,P均〈0.05。其中以19号和41号菌株的产酸和产过氧化氢能力最强,达到了阳性对照菌株水平(P均〉0.05)。Gv的自聚合水平为45.25%,而Ca的自聚合水平则高达100%。乳酸杆菌菌株16号(92.57%)、19号(96.32%)、31号(92.16%)和41号(93.52%)均显示了明�

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