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银杏叶提取物对慢性间歇性低氧大鼠胰岛β细胞氧化应激的影响及机制探讨

作者:李无双; 周燕; 周璇慢性间歇性低氧银杏叶提取物氧化应激核因子2相关因子阻塞性睡眠呼吸暂停综合征

摘要:目的探讨银杏叶提取物(EGB)对慢性间歇性低氧(CIH)大鼠胰岛β细胞氧化应激反应的影响及其机制。方法取10只SD大鼠置于低压氧舱内模拟间歇性低氧条件制备CIH模型,另取10只大鼠在常氧条件下饲养。于造模12周结束后,提取CIH模型大鼠及常氧饲养大鼠的原代胰岛β细胞,将常氧饲养大鼠的原代胰岛β细胞作为常氧对照组,将CIH模型大鼠的原代胰岛β细胞分为CIH模型组、抗核因子2相关因子(Nrf2)抗体组、Nrf2激活剂组、EGB低剂量组、EGB中剂量组、EGB高剂量组。常氧对照组、CIH模型组用普通DMEM培养基培养,抗Nrf2抗体组加入终浓度为20μg/mL的Nrf2抗体,Nrf2激活剂组加入终浓度为20μmol/L的Nrf2激活剂莱菔硫烷,EGB低、中、高剂量组分别加入EGB 5、10、20 mg/mL。各组均干预24 h后,取各组细胞,检测细胞中氧自由基(ROS)含量、细胞上清液中丙二醛(MDA)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平。采用Western blotting法检测Nrf2-抗氧化反应元件(ARE)信号通路相关蛋白Nrf2及下游抗氧化酶靶蛋白血红素加氧酶-1(HO-1)、醌氧化还原酶(NQO1)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)的表达。结果与常氧对照组对比,CIH模型组MDA及ROS均升高,GSH-Px降低(P均〈0.01)。与CIH模型组比较,抗Nrf2抗体组MDA及ROS均升高,GSH-Px降低(P〈0.05或0.01);Nrf2激活剂组、EGB中剂量组、EGB高剂量组MDA及ROS均降低,GSH-Px均升高(P〈0.05或0.01)。EGB高剂量组MDA及ROS均低于EGB低剂量组,GSH-Px高于EGB低剂量组(P〈0.01或0.05)。与常氧对照组对比,CIH模型组Nrf2升高,HO-1、NQO1、γ-GCS均降低(P均〈0.01)。与CIH模型组比较,抗Nrf2抗体组HO-1、NQO1均降低(P均〈0.01);Nrf2激活剂组、EGB中剂量组、EGB高剂量组Nrf2、HO-1、NQO1、γ-GCS均升高(P〈0.05或P〈0.01)。EGB高剂量组Nrf2、HO-1、NQO1、γ-GCS均高于EGB中剂量组(P〈0.05或0.01)。结论

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