缺铁逆境胁迫下水稻叶蛋白质组的双向电泳分析

作者：柴小清; 靳飞; 张艳萍; 卫功宏; 印莉萍可溶性蛋白白质诱导缺铁胁迫表达双向电泳分析叶蛋白水稻

摘要：水稻幼苗经缺铁胁迫诱导处理1、3、5 d后,用酚法和TCA/丙酮法提取叶的可溶性蛋白,进行双向电泳(2-DE)分析.结果显示:(1)三种缺铁胁迫的可溶性蛋白,在不同的pH范围中2-DE图谱上的比较.使用pH3～10宽范围、线性(L)的IPG胶条,经电泳分离后利用Z3图象分析软件,可在SDS-PAGE凝胶上检测到450个左右的蛋白点,酸性蛋白占89%.选用pH4～7窄范围、线性(L)的IPG胶条,经电泳后可在SDS-PAGE凝胶上检测到600个左右的蛋白点,其中缺铁诱导上调表达的有29个点,减弱表达的有1个点,诱导特异表达的有5个点.(2)不同方法提取可溶性蛋白的差异.酚法提取的蛋白再溶性好,纯度较高.TCA/丙酮法简单易操作,蛋白损耗少,在2-DE图象上,碱性端显示的蛋白点较多,但此法的缺点是再溶性差,对2-DE成功分离蛋白有影响.

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