作者：周吉东; 郝晓蔚; 王敏; 史吉平; 郝健克雷伯肺炎杆菌2乙酰乳酸合成酶丁二醇脱氢酶
摘要：克雷伯肺炎杆菌2,3-丁二醇合成相关基因形成bud操纵子，其中budB编码乙酰乳酸合成酶，budC编码丁二醇脱氢酶。除了bud操纵子中的基因外，在缬氨酸合成途径中ilvB和ilvI也编码乙酰乳酸合成酶，dhaD、gldA和acyI三个脱氢酶都报道具有丁二醇脱氢酶活性。但是这些基因编码的酶蛋白对菌株合成2,3-丁二醇的贡献并不清楚。本文分别构建了budB、ilvB、ilvI单突变株，和kp-ΔbudC-ΔdhaD-ΔgldA-Δacyl四基因突变株，通过批次发酵实验对这些菌株的生理特性进行了研究。结果显示ilvB和ilvI基因突变对于2,3-丁二醇合成无明显影响，而budB突变株丧失2,3-丁二醇合成能力，表明budB编码的酶蛋白是2,3-丁二醇合成途径中唯一的功能性乙酰乳酸合成酶。kp-ΔbudC-ΔdhaD-ΔgldA-Δacyl四基因缺失突变株合成2,3-丁二醇能力相较于kp-ΔbudC有所下降，但仍然能合成2,3-丁二醇，表明dhaD，gldA和acyI编码的酶蛋白对于2,3-丁二醇合成贡献微弱，同时表明细胞中具有丁二醇脱氢酶功能的醇脱氢酶种类较多。
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