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Chelex100法从贮存食管拉网脱落细胞涂片中提取DNA并作PCR分析的应用和意义

作者:赵雍凡; 张俭荣; 阎齐; 陈国第chelex100食管重度不典型增生食管拉网脱落细胞涂片dna提取

摘要:目的探讨从贮存20年的食管拉网脱落细胞涂片的微量细胞中抽提DNA的方法和可行性;比较p53基因在正常食管上皮和重度不典型增生上皮中的突变差异.方法利用螯合型离子交换树脂Chelex100作为介质,一步法从食管拉网脱落细胞中提取用作PCR分析的DNA,共提取食管正常上皮与重度不典型增生上皮细胞涂片各24例,采用PCR-SSCP分析法进行p53基因第7外显子的突变检测.结果所有48例标本中微量细胞的DNA抽提均获成功;正常食管组p53基因第7外显子均未发生突变,重度不典型增生组5例发生突变,其中3例在10年、12年、14年后转变为食管癌.结论 Chelex100法简便、高效,能从微量细胞中抽提DNA,使对20年前食管拉网细胞涂片进行分子水平的检测成为可能;p53基因第7外显子的突变使食管上皮重度不典型增生细胞具有了癌变趋势.

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四川医学

《四川医学》(CN:51-1144/R)是一本有较高学术价值的大型月刊,自创刊以来,选题新奇而不失报道广度,服务大众而不失理论高度。颇受业界和广大读者的关注和好评。 《四川医学》读者主要为省、市、县级医疗机构的医务人员、管理人员,具有容量大,出版周期短,发表文稿多、快,发行量大的特点。本刊于2003年开辟医学继续教育专栏,即读专家讲座文章,做相关测验答卷,然后由四川省医学会授于继续教育学分。

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