作者：王献刚; 郝志红; 袁清敏; 冯保静牙周膜细胞靶向调控基因筛选
摘要：目的筛选测定牙周膜细胞内miR-23a、miR-30a发挥靶向调控作用的基因。方法采用miRanda、PicTar及TargetSan三个靶基因预测软件预测miR-23a、miR-30a的候选靶基因;通过体外炎性微环境模拟检测及炎症牙周膜细胞的miR-23a、miR-30a表达水平干预,采用实时定量PCR仪检测miR-23a、miR-30a及其候选靶基因表达情况,筛选miR-23a、miR-30a可能的靶基因;并采用免疫印迹法对靶蛋白进行进一步鉴定。结果预测软件提示,miR-23a、miR-30a有Runx2、CAMTA1、STAT1、STATB1、CNTTBIP、STAT5B、PPPAR七个共同的候选靶基因;实时定量PCR检测提示,STAT5B与Runx2可能是miR-23a、miR-30a的靶基因;免疫印迹检测提示STAT5B与Runx2蛋白表达水平变化趋势与实时定量PCR检测结果具有一致性,提示STAT5B可能是miR-23a的靶基因,Runx2可能是miR-30a的靶基因。结论 miR-23a、miR-30a均参与了炎性微环境下牙周膜细胞的生物学活性表达,且STAT5B、Runx2分别可能是miR-23a、miR-30a的靶基因。
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