作者：张壮苗 杨春 徐蕾 何永林 王静娴 董志玲 ...结核分枝杆菌免疫应答
摘要：目的构建Iprl／PPE68重组卡介苗（RecombinantBCG，rBCG），探讨其诱导BALB／C小鼠免疫应答的效果。方法将Iprl和PPE68基因及结核分枝杆菌（mycobacteriumtuberculosis，MTB）复制子OriM分别插入pBudCE4-1的多克隆位点，构建共表达穿梭质粒pBIPO，将其电转入BCG，构建Iprl／PPE68-rBCG并将rBCG免疫BALB／C小鼠，检测小鼠血清中IgG2a、IL-12、IFN-1及IL4的水平、特异性脾淋巴细胞增殖和CD4＋和CD8＋T细胞数量，同时观察脾、肺荷菌量及脾、肺组织病理学变化。结果酶切测序及菌落PCR鉴定Iprl和PPE68以及OriM基因序列与理论值相符，Western-blotting结果显示Iprl和PPE68蛋白成功表达。Iprl／PPE68-rBCG免疫小鼠后，血清中的IgG2a和IL-12水平及脾淋巴细胞增殖情况明显高于对照组，但与BCG组相比没有显著意义；IFN．1水平显著低于BCG组，与对照组相比无显著性差异；各组别IL-4的水平差异均不明显。脾、肺荷菌实验未见菌落生长，肺、脾组织未见病理学改变。结论成功构建Iprl／PPE68-rBCG，该重组BCG能诱导BALB／C小鼠的细胞免疫应答。
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