作者:黄新河; 冯兴; 刘鑫; 李佳; 张勇侠; 国锦...部分性新鲜精液酸性磷酸酶离子交换柱层析g蛋白纯化凝胶过滤瘦肉型猪纱网胶状物
摘要:用纱网滤掉瘦肉型猪(PIC344)新鲜精液中胶状物得原精液,该原精液经硫酸铵分段盐析、DEAE-Sepharose F.F.离子交换柱层析、Sephacryl S-200凝胶过滤后分离纯化到酸性磷酸酶(Acid Phosphatase,简称ACPase).纯化倍数为22.78,酶液比活力为15.26U/mg蛋白.纯化酶液经非还原性SDS-PAGE检测,呈现单一蛋白着色带.测得该酶相对分子质量为52.3kD,等电点为5.1,米氏常数(Km值)为3.08×10-3mol/L.测得该酶最适pH为3.6,最适温度为52℃.ACPase在pH 3.5~6.0范围内稳定,在40℃以下稳定,50℃保温30min后酶活仍能保持59.2%.
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