作者：郭会灿硝基呋喃代谢物荧光免疫层析免疫抗原量子点微球
摘要：为建立一种基于量子点荧光免疫层析技术快速检测4 种硝基呋喃类代谢物的方法,采用N-羟基琥珀酰亚胺(N-hydroxysuccinimide,NHS)、1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide hydrochloride,EDC)法合成4 种硝基呋喃类代谢物的人工抗原,并融合制备对应的单克隆抗体,通过EDC-NHS一步法将量子点微球(quantum dot submicrobeads,QBs)分别与3-氨基-2-恶唑烷酮(3-amino-2-oxazolidinone,AOZ)、5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮(5-morpholine-methyl-3-amino-2-oxazolidinone,AMOZ)、1-氨基-2-乙内酰(1-aminohydantoin,AHD)和氨基脲(semicarbazid,SEM)偶联,得到相应的QBs探针,在此基础上制备复合荧光免疫层析试纸条。结果表明:AOZ、AHD、SEM和AMOZ的检出限分别为0.4、0.4、0.5、0.5 μg/L;通过加标回收实验对批内和批间的重复性和准确度进行评价,得出该试纸条的批内检测回收率为80%~110%,批内变异系数在15%以内,批间回收率为80%~100%,批间变异系数在15%以内;且AOZ、AHD、SEM和AMOZ之间的交叉反应率小于0.1%,说明成功将荧光免疫层析技术和多元检测技术相结合,应用于同时检测4 种硝基呋喃类代谢物,且试纸条的灵敏度和准确性高、特异性好。
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