作者:廖扬勋; 陈志忠; 丁浩强; 余文潮; 梁洁贞...人类血小板抗原基因分型
摘要:目的 利用分子生物学测序技术聚合酶链反应直接测序方法(PCR-SBT))对血小板抗原(HPA)-3系统进行基因分型。方法 采用本研究合成的引物,应用分子生物学测序技术对101名随机血小板捐献者进行HPA-3基因分型,随机抽样20个标本进行聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)基因分型作为平行对照,质控DNA进行验证。结果 最终选取61℃的为理想退火温度。采用合成的引物对4份质控标本作HPA-3基因分型:与Innotrain提供的结果完全一致。101名随机汉族血小板志愿捐献者HPA基因频率为HPA-3a 0.520、HPA-3b 0.480;随机抽样20个样品与Inno-train公司的HPA-SSP分型结果一致。结论 所建立的HPA基因PCR-SBT分型技术分辨率高,正反向引物测序结果一致,都可以精确分型,可以弥补PCR-SSP不足。
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