作者：邓新燕 杨景超 陆杰 聂恩琼 张应涛 郭中...上胚层多分化潜能上胚层干细胞活化素
摘要：目的获取SD大鼠胚胎中附植后的胚胎上胚层干细胞（Epi SCs）,并就影响SD大鼠Epi SCs（SDEpi SCs）分离与培养的组织来源、胎龄、细胞因子等条件进行探讨,从而探索适宜SD大鼠Epi SCs分离培养的实验体系,为下一步SD大鼠Epi SCs的建系提供实验研究基础。方法以昆明小鼠胚胎成纤维细胞为饲养层,分别取5.5日胎龄的囊胚和7.5日胎龄囊胚上胚层（Epiblast）,用添加白血病抑制因子（LIF）或活化素（activin）的基础培养基进行原代培养,分别采用机械法和胰酶消化法对克隆集落进行传代培养。最后通过碱性磷酸酶染色对克隆集落进行鉴定分析,并检测其体外分化能力。结果培养于LIF培养基和activin培养基中的囊胚均发生严重分化。培养于LIF培养基中的Epiblast也发生了严重的自发分化,而在activin培养基中,Epiblast形成SDEpi SCs原代集落。经机械法传代获得AKP染色阴性、能形成拟胚体的SDEpi SCs。结论利用细胞因子activin,结合机械传代法可从7.5日胎龄SD大鼠胚胎中获得SDEpi SCs。
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