作者：刘利东; 涂洪斌; 李冰spike蛋白定点诱变
摘要：目的分析确定SARS-CoV splke蛋白序列中对SARS—CoV的感染能力相关性较强的位点，并进行定点诱变。方法比对不同来源株SAPS-CoV的Spike蛋白的序列，计算其相应位点的突变墒值和突变几率，结合进一步的生物信息学分析，筛选出经预测可能影响spike蛋白与其受体结合进而导致SARS病毒对宿主细胞的膜融合侵染能力的7个位点，对各个位点用重叠延伸PCR法或直接PCR法进行人工定点诱变，获7个突变片段，之后将各片段亚克隆至克隆载体PSP72中。结果经PCR和测序确认各片段点突变成功，并正确插入克隆载体PSP72中。结论成功实施Spike蛋白的定点诱变，获得7个突变片段的重组子，这些突变体可为研究这些突变位点在Spike蛋白与受体结合中的意义，进而可为阐述spike蛋白的结构与功能的关系、揭示Spike蛋白变异与SARS病毒侵入（染）细胞能力的相关性提供坚实的实验基础。
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