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定点诱变自我剪接Ⅰ型内含子核酶

作者:熊宇泉; 李冰定点诱变自我剪接

摘要:目的验证嗜热四膜虫核酶自我剪接功能,定点诱变Ⅰ型内含子核酶及检测其自我剪接功能.方法PCR扩增嗜热四膜虫核酶基因连入pGEM-T载体,通过重组PCR获得3个非发夹区域定点诱变的Ⅰ型内含子核酶基因,连入pG-EM-T载体,分别进行体外转录.结果嗜热四膜虫核酶及诱变的3个核酶自我剪接功能完全.结论非发夹区诱变的核酶不改变其自我剪接的功能,为以后反式剪接核酶的设计构建提供了更多的选择基础.

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热带医学

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