作者：孙晓敏; 郝文波; 王萍; 李明; 贾钰华恶性疟原虫分子克隆基因表达
摘要：目的构建 EBA- 175Ⅱ区 F2结构域基因的原核表达载体. 方法采用 PCR的方法从恶性疟原虫基因组 DNA中扩增出 EBA- 175Ⅱ区 F2结构域 856～ 1848 bp基因,定向克隆入 PMD18- T质粒,再经 BamHⅠ和 XhoⅠ酶切亚克隆入高效表达载体 pET23a(+ ).重组质粒经 PCR、酶切、测序鉴定后,在 BL21( DE3)菌株中进行 IPTG诱导表达.结果重组质粒经序列测定证实插入基因为目的基因,符合表达框架,经 IPTG诱导,在 BL21( DE3)菌株中以非融合蛋白形式表达, SDS- PAGE电泳显示在约 36.4 kDa处可见明显蛋白增粗条带,与预期结果一致.结论成功构建了重组 EBA- 175Ⅱ区 F2结构域基因表达载体,并在 BL21( DE3)中有效表达.
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
