作者:王芳; 曹西南催化结构域大肠杆菌表达与纯化
摘要:目的通过构建蛋白激酶 Cε原核表达载体以获得纯化的 PKCε蛋白. 方法将 PKCε催化功能域(野生型和突变型)构建至原核表达载体 pUC18上形成重组质粒 pUC-CK和 pUC-CR, 将其转化至大肠杆菌 DH5α细胞中诱导其高效表达. 结果表达产物的 SDS-PAGE电泳及 Western blot检测表明,催化功能域在大肠杆菌中成功表达,并对其进行了部分纯化.结论获得纯化的 PKCε蛋白,为今后大量表达、纯化该酶蛋白作了前期铺垫.
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