作者：张彦明; 吴英松; 董文其; 李明痘苗病毒d13l基因真核细胞稳定表达
摘要：目的建立稳定表达痘苗病毒D13L基因的细胞系.方法克隆D13L基因并将其插入真核表达质粒pEGFP-C2中构建重组质粒pEGFP-D13L,利用脂质体法转染BHK21细胞,G-418进行筛选,有限稀释法获取亚克隆细胞株.荧光显微镜观察和RT-PCR分析表达效果.结果D13L基因在细胞中稳定表达,连续传代10次后仍然能检测到其表达,荧光显微镜下能看到绿色荧光,RT-PCR可以得到1650bp大小的目的条带.结论筛选到了稳定表达D13L基因的细胞株,为下一步构建缺陷型痘苗病毒以及研究D13L基因的功能奠定基础.
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