作者：蔡元保; 杨祥燕; 陈显国; 曾黎明; 郭凌飞...澳洲坚果scot单因素试验体系优化dna指纹图谱
摘要：为建立澳洲坚果（Macadamia spp．）的SCoT最适反应体系，用单因素设计方法对影响SCoT-PCR反应体系的主要影响因素进行了优化筛选，并构建了澳洲坚果种质的指纹图谱。结果表明，澳洲坚果的SCoT最适反应体系为：反应体系总体积为20此，包含2．5mmol L^-1Mg^2＋，0．3mmol L^-1 dNTPs，0．8μmol L^-1引物，40mg L^-1模板DNA和1．0UTaq DNA聚合酶。最适退火温度为50℃。该反应体系对澳洲坚果种质具有良好的稳定性、可靠性和较高的分辨率。选用多态性良好的单引物SC5和引物组合SC34＋SC39，可以将12份澳洲坚果种质完全区分开，每份种质都各有独特的指纹图谱，置信概率达到99．988％。构建的SCoT反应体系可为澳洲坚果种质鉴定和遗传多样性分析等提供技术支持。
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