作者:何玮毅; 陈晓静; 申艳红; 卢秉国; 潘东明番木瓜rna干扰遗传转化
摘要:克隆了番木瓜(Carica papaya L.)果肉的细胞壁水解关键酶β-半乳糖苷酶(β-GAL)基因保守区,将其反向重复插入载体pKANNIBAL,构建RNAi中间表达载体pKAN/RG,将其上的发夹结构取代经改造的载体pCAMBIA 1300上hptII基因,构建中间表达载体p1300/MFRG,分离单T-DNA区段,与载体pCAMBIA 2301构建RNAi双T-DNA植物表达载体p2301/TTRG。酶切分析和PCR检测表明,p2301/TTRG已被成功导入农杆菌EHA105。通过遗传转化,初步获得了GUY染色呈阳性且具Kan抗性的番木瓜胚性愈伤组织。
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