作者：罗明武; 邓柳红; 易小平; 曾会才; 肖苏生巴西橡胶树抑制消减杂交法胶乳
摘要：以巴西橡胶树（Hevea bras iliens is ）胶乳的RNA为Tester；叶片RNA为Driver，利用抑制消减杂交法（suppressive subtractive hybridization，SSH）构建了一个胶乳特异表达基因差减文库。通过反式Northern点杂交（reverse Northern dot blots）筛选到一个与顺式异戊烯基转移酶基因（橡胶生物合成的关键酶基因）高度同源的阳性克隆R363。采用RACE方法获得该克隆的全长cDNA（GenBank登陆号：AY461414）。序列分析表明，该基因长1156bp，含有873bp的阅读框，编码290个氨基酸，分子量约为32．9kD，等电点为7．2，含有N-端跨膜螺旋区。同源性分析表明R363编码的蛋白质具有异戊烯基转移酶家族的特征，含有c西-异戊烯基链转移酶的5个高度保守区，推测R363可能是一种新的顺式．异戊烯基转移酶基因。Northern blot分析显示，R363在胶乳中高度表达，在叶中不表达。乙烯处理前后表达强度一致，表明该基因表达不为乙烯所诱导。
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