作者：李冬梅; 朱根发; 叶庆生大花蕙兰基因组dna提取ctabrapd
摘要：用SDS、CTAB和改良CTAB法分别提取大花蕙兰叶片基因组DNA，发现以改良CTAB法提取的DNA纯度高，产率也较高。以5’-GGTGCTCCGT-3’（BA440）为随机引物，并以大花蕙兰品种‘金杯’（Cymbidium hybridium CV．Hiroshima Golden Cup“Sunny Moon”）的DNA为模板，对RAPD（Random Amplified Polymorphic DNA）反应体系进行了优化研究，结果表明，25μl反心体系中，Mg^2＋、Taq DNA聚合酶、引物、模板DNA和dNTP5种主要成分的适宜浓度或用量分别是：2．0mmol／L、L0U、0．20μmol／L、25ng和0.20mmol／L。扩增程序优化为：94℃预变性4min；94℃变性0．5min，37℃退火1min，72℃延伸1min，40个循环；最后72℃延伸7min。
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