作者：芦春斌拟兰芥转化蛋白质表达
摘要：将一个398 bp的植物化的猪α乳清蛋白基因(Lactalbumin,LA)编码区克隆到带有花椰菜花叶病毒的35S启动子的质粒中.对它们进行PCR检测和序列分析,证实这些阳性克隆是实验预期的重组质粒.随即将35S启动子-α-乳清蛋白基因-终止子这一表达单元克隆到双元载体pCG-CB中,用该重组质粒双元载体pCG-CB-Lact转化农杆菌V3101后,以农杆菌法进行拟兰芥植物转化,用除草剂Finale对转化植物进行抗除草剂基因筛选,得到一些抗除草剂的转化植株.对这些抗除草剂植株进行猪α乳清蛋白基因PCR分析,成功筛选到带有猪α乳清蛋白基因并且可以在后代稳定遗传的转基因植物.Western blot蛋白质表达分析,表明猪α乳清蛋白在拟兰芥中成功表达,并且猪α乳清蛋白被正确加工成天然蛋白.
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