作者：许丹云; 王维; 马爱民融合疏水蛋白毕赤酵母转化子响应面分析乳化性起泡性
摘要：运用基因改造方法,将不同来源的Ⅰ型疏水蛋白基因(平菇的Po.hyd1和香菇的Le.hyd)拼接后,构建融合表达载体pPIC9k-Po.hyd1-Le.hyd,并将其电转化到毕赤酵母GS115感受态细胞中,经PCR验证和遗传霉素G418的抗性筛选,得到3个高效表达的毕赤酵母转化子;运用三氟乙酸方法分离纯化发酵上清液中的融合疏水蛋白Po.hyd1-Le.hyd,经检测其单体分子量约为26kD.运用单因素试验和响应面分析试验优化,得到毕赤酵母转化子的最佳诱导表达条件为碳源(甲醇)质量分数为0.62%,氮源(m(酵母提取物)∶m(蛋白胨)=1∶2)质量浓度为8.39g/L,发酵培养基的初始pH值为6.05,YNB质量浓度为100mg/L,装液量为50mL,初始OD600值为1.2.此时融合疏水蛋白Po.hyd1-Le.hyd的产量最高可达30mg/L.对融合疏水蛋白Po.hyd1-Le.hyd起泡性和乳化性的研究发现,其蛋白性质均优于从平菇菌丝中提取的疏水融合蛋白.
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
