作者：王天宝; 李晓飞; 冷萍; 马佳超; 张海宁机械激活性离子通道椎间盘移位椎间盘髓核细胞
摘要：目的探讨新型机械激活性离子通道Piezo1蛋白在人椎间盘髓核细胞应力模型中的表达。方法将人椎间盘髓核细胞分成牵张应力组和牵张应力＋Piezo1蛋白抑制剂组,构建人椎间盘髓核细胞体外培养-应力刺激模型,采用多通道细胞牵张应力加载系统FX-4000T处理髓核细胞,两组均加载0、2、12、24、48h的周期性牵张应力。采用RT-PCR、Western-blot技术检测两组Piezo1的表达水平,应用激光共聚焦显微镜检测Piezo1蛋白荧光的强弱。结果 RT-PCR结果显示,牵张应力组给予2h周期性牵张应力时,Piezo1 mRNA表达较给予0h周期性牵张应力时增加,给予24h周期性牵张应力时Piezo1mRNA表达高于其他牵张应力作用时,而给予48h周期性牵张应力时较给予24h周期性牵张应力时降低,差异有显著性（F=13.917,P〈0.05）。Western-blot结果显示,牵张应力组给予2h周期性牵张应力时Piezo1蛋白表达较给予0h周期性牵张应力时略有增加,给予24h周期性牵张应力时Piezo1蛋白表达高于其他各组,而给予48h周期性牵张应力时Piezo1蛋白表达较给予24h周期性牵张应力时降低,差异有显著性（F=12.781,P〈0.05）。牵张应力＋Piezo1蛋白抑制剂组Piezo1mRNA及其蛋白表达均明显小于牵张应力组。Piezo1蛋白表达于髓核细胞的细胞质与细胞核,荧光较强。结论人椎间盘髓核细胞中Piezo1蛋白稳定表达,并且与应力加载时间相关。
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