作者：彭文彬 杨堃 马学晓 岳斌 胡有谷 陈伯华生存素基质金属蛋白酶抑制剂1慢病毒属椎间盘退变
摘要：目的应用Gateway技术构建生存素（Survivin）、人转化生长因子β3（TGFβ3）和基质金属蛋白酶抑制剂1（TIMP1）慢病毒多表达质粒,并检测其表达活性。方法应用Gateway技术,以自剪切多肽2A串联Survivin、TGFβ3、TIMP1的3段外源基因,并克隆到慢病毒多表达质粒上,通过RT-PCR和Western-blot技术分别检测质粒转染293T细胞后目的基因mRNA和蛋白质表达水平。结果 RT-PCR和Western-blot检测结果显示,慢病毒多表达质粒成功表达了3种目的基因,且其mRNA和蛋白质表达水平较空载体对照组、PBS对照组明显升高,差异有显著性（F=17.87~69.11,q=6.94~15.47,P〈0.05）。结论成功构建了慢病毒多表达质粒pLenti6.3-Survivin-P2A-TGFβ3-T2A-TIMP1,为下一步病毒的制备以及体内实验提供了基础。
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