作者：郑得亮 毛伟征 马贵亮腺病毒科基因沉默rna干扰质粒
摘要：目的构建沉默人IκB激酶β（IKKβ）基因表达的RNA干扰（RNAi）腺病毒,了解其对IKKβ基因表达的作用。方法根据GenBank IKKβ基因的mRNA,利用RNAi Designer工具软件设计合成4对IKKβ基因的特异性小干扰RNA（siRNA）,合成互补的寡核苷酸链,构建重组腺病毒,鉴定目的基因。构建IKKβ基因过表达质粒,以与RNAi腺病毒质粒共同转染HEK293T细胞作为实验组,不转染任何质粒的细胞作为空白对照组,共转染过表达质粒和阴性对照病毒载体质粒的HEK293T细胞为阴性对照组,蛋白免疫印迹（Western Blot）方法检测各组HEK293T细胞中IKKβ基因表达。结果成功构建IKKβ-RNAi腺病毒质粒及IKKβ过表达质粒,实验组IKKβ基因表达较空白对照组及阴性对照组下降,差异有显著性（t=49.18、44.648,P〈0.05）。结论构建的IKKβ-RNAi腺病毒质粒能有效抑制IKKβ基因表达,为进一步探讨肿瘤的生物治疗提供理论基础。
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