作者:张文鹏 叶发刚 禇言琛骨髓间质干细胞细胞培养技术成骨分化兔
摘要:目的观察密度梯度离心并贴壁培养法体外分离纯化兔骨髓间充质于细胞的效果,以及诱导后的兔骨髓间充质干细胞的成骨特性。方法采用密度梯度离心法结合贴壁培养法分离兔骨髓间充质干细胞。采用倒置显微镜进行形态学观察、免疫细胞化学法鉴定骨髓问充质干细胞膜抗原;经成骨培养液诱导培养后,对碱性磷酸酶活性、细胞矿化形成钙化结节的能力进行测定。结果分离的骨髓间充质干细胞24h后贴壁,贴壁细胞平均10d形成克隆,细胞表型稳定。诱导条件下,细胞碱性磷酸酶活性明显增高,Von.Kossa染色可见矿化结节。结论密度梯度离心结合贴壁培养法能有效分离纯化兔骨髓间充质干细胞,用此种方法培养的细胞具有骨髓间充质干细胞的一般生物学特性。
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