作者：郑丽芳 梅元武 张小乔 张红 杨扬骨髓间质干细胞缺血细胞保护
摘要：目的观察转化生长因子β1（TGF-β1）对骨髓间充质干细胞（MSCs）体外模拟缺血性损伤的保护作用。方法采用密度梯度离心结合贴壁法分离、培养大鼠MSCs,对培养第3代的MSCs进行鉴定;用1、2、5μg/L的TGF-β1分别预处理细胞8 h,然后用血清剥夺和低氧（SOD）处理建立MSCs体外模拟缺血性损伤模型,通过流式细胞术评价MSCs的凋亡及存活情况;用Western blot方法检测2μg/L的TGF-β1对Akt和p-Akt表达的影响。结果密度梯度离心结合贴壁法能有效分离、纯化大鼠MSCs,免疫荧光检测显示培养的细胞CD29表达阳性,而CD34表达阴性。用2μg/L的TGF-β1预处理MSCs后,可抑制SOD诱导的细胞凋亡,其早期凋亡率和中晚期凋亡率均明显下降,与凋亡模型组相比差异具有显著性（F=199.77、232.82,P〈0.05）,而PI3K抑制剂Wort-mannin能明显抑制TGF-β1的抗凋亡作用。2μg/L的TGF-β1可升高p-Akt的表达,p-Akt在8 h达到高峰,p-Akt/Akt显著增高,和其他时间点相比差异具有显著性（F=6.306,P〈0.05）。结论TGF-β1对SOD诱导MSCs的凋亡具有抑制作用,其抗凋亡作用是通过激活PI3K/Akt实现的。
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